液相色譜柱怎麼反衝

液相色譜柱反衝是一種色譜技術，透過反向流動色譜柱中的流動相，將雜質和汙染物從柱子中沖刷出來，以維護色譜柱的效能和延長使用壽命。
以下是反衝液相色譜柱的一般步驟：
1. 準備工具和材料：液相色譜儀、色譜柱、流動相（一般使用甲醇或乙腈）、純水、注射器、膠管等。
2. 將液相色譜儀與色譜柱連線，確保連線緊密，無洩漏。
3. 將流動相加入液相色譜儀的流動相容器中，確保液麵在合適的位置。
4. 開啟液相色譜儀，將流動相流經色譜柱，並保持流速在0.5-1 mL/min之間。
5. 觀察液相色譜儀的出口，看是否有雜質或汙染物的排出。如果排出物汙染嚴重，可以增加反衝時間或更換流動相。
6. 反衝完成後，用純水沖洗色譜柱，直到出口流出清澈的液體為止。
7. 最後，將色譜柱重新安裝到液相色譜儀上，並開始下一次的分析。
需要注意的是，反衝液相色譜柱是一種較為複雜的技術，需要一定的經驗和技能。在反衝過程中，需要注意安全，避免流動相濺出導致皮膚接觸或眼睛受傷。同時，反衝時間不宜過長，一般建議在10-30分鐘之間。如果反衝後色譜柱效能仍未得到改善，可能需要更換新的色譜柱。

液相色譜柱反衝是指將逆流溶液透過柱子，以便清洗和再生色譜柱。在反衝過程中，首先需要將柱子與逆流溶液連線，然後將逆流溶液透過柱子，直到柱子內的廢液全部被衝出。

接下來，需要用純淨水沖洗柱子，以便徹底清洗出廢液和雜質。最後，將柱子與執行液連線，進行再生操作。反衝可以延長柱子使用壽命，確保柱子分離效果的穩定性和準確性。

液相色譜柱的反衝是一個備受爭議的話題。雖然反衝可以有效地清除堵塞在入口端的篩板上的汙染物，或是來自柱頭處的雜質，從而是一種非常有效的補救措施，但是需要注意的是，反衝過程可能會對色譜柱造成損害，降低柱效，甚至可能改變矽膠小球在色譜柱中的分佈。因此，在進行反衝之前，一定要確保這是必要的，如確認柱子是否能夠進行反衝，以及明確汙染的來源。

如果決定進行反衝，可以按照以下步驟操作：首先，降低流動相的流速；然後，切換流動相的方向；接著，提高流動相的壓力以沖洗色譜柱；最後，逐漸降低壓力至正常水平。此外，有一些更具體的反衝策略，例如使用清洗、再生和反接的方法來進行挽救。這些方法包括用乙腈或異丙醇進行低流速沖洗，或者進行一系列的溶劑沖洗和再生步驟。

總的來說，儘管反衝是一種可能的解決辦法，但由於其潛在的風險和對色譜柱效能的影響，通常不建議隨意對液相色譜柱進行反衝。因此，在決定是否以及如何進行反衝時，應充分了解您的色譜柱型別、填充物、製造商的建議以及樣品的特性。

液相色譜柱反衝如下。

本實驗室主要使用C18柱，為反相柱。長期不用會使用100%甲醇或者已經沖洗20倍柱體積。有時會是98%或者95%的甲醇或者乙腈，儲存。具體的沖洗程式根據最後跑的樣品流動相決定。用過緩衝鹽或者酸一定要用高水相清洗，本實驗室使用的90%水相沖洗20倍柱體積。然後緩慢過渡到高有機相。色譜儀用過的緩衝鹽或酸的泵以及其管道也要用水相清洗。

關於糖柱也用過，屬於正相柱。在走樣品時我記得水相的比例不能超過60%，儲存也只能使用100%有機相儲存。