液相色譜按分離機理分為吸附、分配、交換、排阻以及親和五種型別。
利用組分在吸附劑(固定相)上的吸附能力強弱不同而得以分離的方法,稱為吸附色譜法。
固定相是固體,目前這種分離模式在液相色譜中用途很小。
利用組分在固定液或者鍵合固定相(固定相)中溶解度不同而達到分離的方法稱為分配色譜法。
固定相是塗覆的固定液或者鍵合的固定相,是目前主流的分離模式,涵蓋了目前液相色譜應用範圍的大部。
利用組分在離子交換劑(固定相)上的親和力大小不同而達到分離的方法,稱為離子交換色譜法。
該分離模式主要用來分離離子型化合物,正是由於如此,現在離子色譜已經從液相色譜中分離出來,稱為離子色譜。
利用大小不同的分子在多孔固定相中的選擇滲透而達到分離的方法,稱為凝膠色譜法或尺寸排阻色譜法。
這個主要用來分離高分子子化合物,比如蛋白、比如聚合物。
利用不同組分與固定相(固定化分子)的高專屬性親和力進行分離的稱為親和色譜法,常用於蛋白質分離。
1、吸附色譜法
吸附色譜法的固定相為吸附劑,色譜的分離過程是在吸附劑表面進行的,不進入固定相的內部。與氣相色譜不同,流動相(即溶劑)分子也與吸附劑表面發生吸附作用。
2、分配色譜法
這種色譜的流動相和固定相都是液體,樣品分子在兩個液相之間很快達到平衡分配,利用各組分在兩相中分配係數的差異進行分離,類似於萃取過程。
3、離子交換色譜
離子交換色譜通常用離子交換樹脂作為固定相。一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換,由於各組分離子的交換能力不同,從而達到色譜的分離。
4、凝膠色譜法
凝膠色譜法既適用於水溶液的體系,又適用於有機溶劑的體系。
當所用的洗脫劑為水溶液時,稱為凝膠過濾色譜,其在生物界的應用比較多;採用有機溶劑為洗脫劑時,稱為凝膠滲透色譜,在高分子領域應用較多。
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